RNA操作是目前研究的熱點(diǎn)之一。要實(shí)現精確的RNA操作,需要特異地識別靶向目標RNA分子并對其進(jìn)行剪切。但到目前為止,這類(lèi)序列特異的RNA內切酶在自然界中還沒(méi)有被發(fā)現。因此,尋找一類(lèi)序列特異的RNA內切酶顯得尤為重要。
中國科學(xué)院植物研究所盧從明研究組通過(guò)一系列生化實(shí)驗發(fā)現,PPR-SMR蛋白家族成員SOT1能夠在體外特異且高效地剪切其RNA底物。通過(guò)生化、分子與遺傳等分析,研究人員進(jìn)一步發(fā)現SOT1的PPR結構域能夠特異識別葉綠體23S-4.5S核糖體RNA前體5′末端一段含有13個(gè)核苷酸的序列,并通過(guò)其SMR結構域剪切了該識別序列的下游序列,從而參與了擬南芥葉綠體23S-4.5S核糖體RNA前體的成熟。研究人員還通過(guò)突變SOT1蛋白的PPR結構域的特定位點(diǎn),使突變的蛋白能夠識別并剪切預期的RNA底物而不再識別并剪切原來(lái)的RNA底物。這一結果首次證明SOT1具有序列特異的RNA內切酶活性,且能夠被人工改造用來(lái)識別并剪切預期的RNA底物,可以作為一種RNA操作工具而具有廣泛的應用前景。
該研究結果于2月6日在線(xiàn)發(fā)表于《美國科學(xué)院院刊》(PNAS)上。盧從明研究組博士研究生周穩和副研究員盧慶陶為該論文共同第一作者。該研究工作得到科技部“973”項目、中科院前沿科學(xué)重點(diǎn)研究項目和B類(lèi)戰略性先導科技專(zhuān)項的資助。
SOT1可程控地識別并剪切不同RNA底物
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