付彥秋　于樹(shù)軍　張乃勇
(長(cháng)春市園林科學(xué)研究所)

摘　要：以矮牽牛種子為外植體，將其接種在MS+6��BA1mg/L+NAA0.03mg/L的培養基中進(jìn)行培養，7～10天種子開(kāi)始萌芽，15～20天新芽被誘導成愈傷組織，30天左右愈傷組織被誘導分化出叢生芽，再將叢生芽接種于MS+6��BA0.5 mg/L+NAA0.05 mg/L的培養基中進(jìn)行繼代培養出成苗，最后將成苗接種于1/2MS+NAA0.03mg/L培養基中，5～7天可生根，7～10天生根率可達100%。
　　關(guān)鍵詞：矮牽牛；組織培養；快速繁殖
　　矮牽牛（petunia hybrida vilm）又名“碧冬茄”、“靈芝牡丹”，為茄科多年生草本，通常作一年生栽培。原產(chǎn)南美，為矮牽牛（pviolacea）與腋花矮牽牛（p.axillaries）的雜種。矮牽�；ù�，花色豐富，花期長(cháng)，栽培管理省工，園林綠化上需求量大。但由于重瓣或大花品種常不易結實(shí)或實(shí)生苗不易保存母本的優(yōu)良性狀，常采用扦插繁殖，但扦插繁殖速度太慢，滿(mǎn)足不了生產(chǎn)發(fā)展的需要，而組織培養可在短時(shí)期內獲得大量的優(yōu)良種苗。為此，我們于2000～2001年開(kāi)展了矮牽牛組培快繁的研究工作。
　　一、材料與方法
　　(一)材料
　　試驗所用材料為美國矮牽牛雜交一代新品種
　　(二)方法
　　1�辈牧系南�毒和接種
　　將矮牽牛種子用少量洗滌劑洗去表面灰塵，用蒸餾水沖洗干凈，放入70%酒精中消毒2分鐘，之后用無(wú)菌水沖洗3次，再用0.1%升汞溶液消毒10分鐘，用無(wú)菌水沖冼4次備用，將消毒后的種子在無(wú)菌條件下接種于培養基中。
　　2�迸囵B基的篩選
　　本試驗采用的培養基為MS培養基，附加的植物生長(cháng)調節物質(zhì)為BA和NAA；蔗糖濃度為3%，卡拉膠濃度為0.4%，PH值為5.8。培養基篩選時(shí)，首先進(jìn)行細胞分裂素（BA）濃度的篩選。
　　方法：
　　在添加0.03 mg/LNAA的培養基中添加不同濃度的BA。其濃度為0.1、0.5、1.0、和1.5 mg/L，培養30天后，根據培養物的生長(cháng)狀況和增殖數量確定最佳的BA濃度。然后進(jìn)行生長(cháng)素（NAA）濃度的篩選，其方法為：在上述篩選出最佳BA濃度的培養基中添加不同濃度的NAA。其濃度為0.01、0.02、0.03和0.04 mg/L。根據培養物的生長(cháng)狀況和增殖數量，確定最佳生長(cháng)素濃度。
　　3�迸囵B條件
　　接種后的培養物放置在培養架上進(jìn)行培養，出芽前需遮光，培養溫度控制在23±2℃。光強為1500～2000LX，每天光照14小時(shí)。
　　二、結果與分析
　　(一)芽的誘導
　　將滅菌的種子接種在MS+不同濃度的6��BA+NAA0.03 mg/L的培養基上，6��BA的濃度為0.1、0.5、1.0和1.5 mg/L，經(jīng)10～30天，種子萌發(fā)，并誘導出愈傷組織，同時(shí)分化出許多叢生芽。結果表明，6��BA的濃度以1.0 mg/L為最佳。以同樣方法篩選NAA最佳濃度為0.03 mg/L。
　　(二)芽的增殖和生長(cháng)
　　將分化出的叢生芽分別轉接到MS+6��BA0.1mg/L+NAA0.02mg/L（處理1）、MS+6��BA0.3mg/L+NAA0.02 mg/L（處理2）、MS+6��BA0.5 mg/L+NAA0.02 mg/L（處理3）、MS+6��BA0.5 mg/L（處理4）培養基上，20～30天繼代一次，從表1看出，在生長(cháng)素濃度相同情況下，高濃度的6��BA提高了苗的繁殖系數，且苗的生長(cháng)狀況也隨之發(fā)生變化，在不含生長(cháng)素的培養基中，苗的生長(cháng)受到影響。

表1 不同培養基對試管苗增殖和生長(cháng)的影響（見(jiàn)園林科技信息）

表2不同濃度對試管苗生根的影響（調查時(shí)間為10天）（見(jiàn)園林科技信息）

　　當試管苗根長(cháng)2～3cm時(shí)，可進(jìn)行試管苗移栽，根據試驗，以珍珠巖為基質(zhì)的幼苗移栽成活率為68%，而以沸騰爐渣為基質(zhì)和以蛭石和珍珠巖（比例為2：1）為基質(zhì)的幼苗成活率分別為92%和93%，這說(shuō)明以沸騰爐渣、蛭石與珍珠巖混合為基質(zhì)的均可。試管苗移栽后管理非常重要，要注意控制好溫度、濕度及光照，試管苗移栽后要搭塑料拱棚，光強時(shí)要適當遮蔭，每天早晚通風(fēng)一次，一周后將塑料拱棚去掉，試管苗移栽20天后，可移栽到營(yíng)養土中（上盆），一周后可移至室外。
　　三、結論
　　我們采用組織培養的方法快速繁殖矮牽牛獲得成功，并研究出適于矮牽�？旆钡呐囵B基配方和試管苗快速繁殖技術(shù)。外植體的誘導及芽的誘導以MS附加6��BA1.0+NAA0.03mg/L效果最好，芽的分化比較理想的培養基是MS+6��BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L，根的誘導以1/2MS+NAA0.03mg/L效果最佳，根的誘導率為100%，試管苗移栽采用沸騰爐渣為基質(zhì)以及蛭石和珍珠巖混合（2：1）為基質(zhì)效果均較好。移栽成活率分別為92%和93%。

　　參考文獻：
［1］李瑛，鄭國慶.重瓣矮牽牛的組織培養.北方園藝，1993，2.